牛轉(zhuǎn)鐵蛋白在無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)揮重要功能

　　牛轉(zhuǎn)鐵蛋白為無(wú)血清培養(yǎng)基必需添加物組分，通過(guò)與轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(Transferrin Receptor, TfR) 相互作用，在無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)揮重要功能。
 

　　轉(zhuǎn)鐵蛋白能與三價(jià)鐵離子可逆性結(jié)合，調(diào)節(jié)鐵離子轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝，維持細(xì)胞內(nèi)的鐵平衡。
 

　　我們對(duì)轉(zhuǎn)鐵蛋白的轉(zhuǎn)鐵作用都很了解，但其實(shí)它重要的意義在于維持細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，也就是說(shuō)它有類(lèi)似于生長(zhǎng)因子的功能。
 

　　而且，轉(zhuǎn)鐵蛋白也是一種重要的胞外抗氧化劑，可以避免細(xì)胞外環(huán)境中自由基的產(chǎn)生，防止細(xì)胞受到傷害。
 

　　牛轉(zhuǎn)鐵蛋白是血漿中主要的鐵傳遞蛋白，為細(xì)胞內(nèi)化和細(xì)胞代謝提供所需的鐵。研究發(fā)現(xiàn)所有的細(xì)胞生長(zhǎng)都離不開(kāi)轉(zhuǎn)鐵蛋白。
 

　　不但維持正常的細(xì)胞代謝依賴(lài)于以生物活性形態(tài)存在的鐵，鐵還是一些酶的輔助因子，比如RNA聚合酶，DNA合成酶。同時(shí)也是血紅蛋白的重要組成部分。
 

　　轉(zhuǎn)鐵蛋白是血漿糖蛋白，從血漿中分離而來(lái)，牛轉(zhuǎn)鐵蛋白以?xún)煞N分子形態(tài)存在，即分子量分別為74KD和78KD。
 

　　每個(gè)轉(zhuǎn)鐵蛋白分子通過(guò)C端和N端結(jié)構(gòu)位點(diǎn)可以結(jié)合兩分子鐵離子，所以轉(zhuǎn)鐵蛋白以三種形態(tài)存在：脫鐵(不結(jié)合鐵離子)，飽和鐵(結(jié)合兩分子鐵離子)和部分飽和，在生理情況下，轉(zhuǎn)鐵蛋白分子僅有1/3被鐵飽和。
 

　　轉(zhuǎn)鐵蛋白對(duì)于絕大部分細(xì)胞系在無(wú)血清培養(yǎng)基中生長(zhǎng)是必需的，研究表明飽和鐵形態(tài)的轉(zhuǎn)鐵蛋白對(duì)于促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)是有效的形態(tài)。對(duì)于雜交瘤，黏連細(xì)胞和懸浮細(xì)胞系，在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，應(yīng)保持培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)鐵蛋白濃度在0.5-100μg/ml。針對(duì)不同的細(xì)胞系，需要選擇合適的濃度。
 

　　保存溫度(Storage Temperature)：
 

　　轉(zhuǎn)鐵蛋白凍干粉需要保存在冷藏狀態(tài)下，使用之前再溶解。一般用PBS或者其它合適的溶劑在室溫下將轉(zhuǎn)鐵蛋白凍干粉溶解成儲(chǔ)液，濃度在0.5-2.0mg/ml,然后用無(wú)菌濾膜進(jìn)行過(guò)濾，濾液可在無(wú)菌條件下2-8℃保存30天，長(zhǎng)期保存請(qǐng)分裝后存放于-80℃。