了解一下GelRed核酸染料的使用方法吧

　　GelRed核酸染料是一種具有凝膠染色特性，并被設(shè)計(jì)為替換高毒性染色劑-溴化乙錠(EB)的紅色熒光核酸染色劑。
 

　　GelRed核酸染料既可用于前染(precast gel staining)，也可用于后染(post gel staining)。通常后染比前染能夠獲得更靈敏的特性，并能排除染色劑在電泳過程中對(duì)核酸條帶分離造成任何影響的可能性。
 

　　然而，前染較后染更為簡單、經(jīng)濟(jì)，因?yàn)榍叭静恍枰~外的著色過程，并且燃料用量更少。因此，假如靈敏度和條帶清晰度不成問題，前染則是一選。我們強(qiáng)烈建議您嘗試兩種染色方法，以便根據(jù)您的需要選擇一選的染色方法。
 

　　使用方法：
 

　　1.膠染法(用法同EB)
 

　　(1)制膠時(shí)加入GelRed核酸染料(例如：每50mL瓊脂糖溶液中加入5μL GelRed 10,000×儲(chǔ)液，以此比例類推)。
 

　　(2)按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
 

　　注意事項(xiàng)：
 

　　此方法染色染料用量相對(duì)較少，500 μL染料大約可以做100塊50 mL的膠。 由于GelRed具有良好的熱穩(wěn)定性，可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷卻。
 

　　搖晃，振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將GelRed儲(chǔ)液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中，然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。
 

　　GelRed兼容所有常用的電泳緩沖溶液。 含有染料的預(yù)制凝膠溶液可以大量制備，并長期保存直到使用。 此方法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠，對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠請(qǐng)使用泡染法。
 

　　2.泡染法
 

　　(1)按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
 

　　(2)用H2O將GelRed 10,000×儲(chǔ)液稀釋約3,300倍到0.1 M NaCl中，制成3×染色液。(例如將15μL GelRed 10,000×儲(chǔ)液和5 mL 1 M NaCl加到45 mL H2O中)。
 

　　(3)將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中，緩慢加入足量的3×染色液浸沒凝膠，室溫振蕩染色30 min左右，染色時(shí)間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對(duì)于含3.5～10%丙烯酰胺的凝膠，染色時(shí)間通常介于30 min到1 h，并隨丙烯酰胺含量增加而延長。